А. Основы спектрофотометрии

Многие молекулы поглощают свет в видимой или ультрафиолетовой области спектра. Это свойство можно использовать для определения концентраций. Величина поглощения зависит от типа и концентрации вещества, а также от длины волны используемого света. Поэтому применяют монохроматический свет, то есть свет определённой длины волны, который можно выделить из белого света с помощью монохроматора. Монохроматический свет интенсивности l₀ проходит через прямоугольную ячейку из стекла или кварца (кювету), в которой находится раствор поглощающего вещества.

Интенсивность I выходящего света, ослабленного поглощением, измеряется с помощью детектора. Поглощение света (А) раствора (оптическая плотность) определяется как отрицательный логарифм отношения l/l₀. Закон Ламберта-Бера гласит, что А пропорциональна концентрации (c) вещества и толщине (d) слоя раствора. Коэффициент экстинкции ε зависит, как было указано выше, от типа вещества и длины волны.

Статьи раздела «Ферментативный анализ»:

• Ферментативный анализ
• А. Основы спектрофотометрии
• Б. Определение активности лактатдегидрогеназы
• В. Ферментативное определение глюкозы

— Следущая статья   |   — Вернуться в раздел